大鼠抑制素B（INH-B）Elisa試劑盒使用說明書 本試劑盒僅供研究使用。 檢測范圍：96T 2.5ng/L-160ng/L 使用目的： 本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抑制素B（INH-B）含量。 實驗原理 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠抑制素B（INH-B）水平。用純化的大鼠抑制素B（INH-B）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抑制素B（INH-B），再與HRP標(biāo)記的抑制素B（INH-B）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抑制素B（INH-B）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準曲線計算樣品中大鼠抑制素B（INH-B）濃度。 試劑盒組成 1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準品（160ng/L） | 0.5ml×1瓶 | 3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 | 5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 | 6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標(biāo)本要求 1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 操作步驟 - 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
80ng/L | 5號標(biāo)準品 | 150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 | 40ng/L | 4號標(biāo)準品 | 150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 | 20ng/L | 3號標(biāo)準品 | 150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 | 10ng/L | 2號標(biāo)準品 | 150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 | 5ng/L | 1號標(biāo)準品 | 150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
- 溫育：操作同3。
- 洗滌：操作同5。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
- 公司能提供的酶聯(lián)免疫試劑盒種類有：大象、牛、大鼠、小鼠、人、馬、兔、大熊貓、類人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、魷魚、蝸牛、扁豆、豌豆、馬鈴薯、蟈蟈、豚鼠、倉鼠、金黃地鼠、鵝、鴿子、禿鷲、河馬、犀牛、野豬、東北虎、斑鳩、蚯蚓、鯉魚、眼鏡蛇、青蛙、丹頂鶴、鳥類等動植物種屬
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